Microscopia e cultura - Informações, especialistas e perguntas frequentes

O que é  microscopia e cultura?

Ambos são meios pelos quais usamos para determinar a causa de uma infecção. O procedimento utilizado geralmente começa com a tomada de amostras de tecido de exsudatos paciente, fluidos corporais, etc. Em seguida, estas amostras são estudadas no laboratório de microbiologia. O microscópio permite observar os micróbios (os presentes nas mesmas amostras), tais como fungos ou bactérias. A cultura contribui para a proliferação destes microorganismos e, portanto, é capaz de estudar melhor.

Como é isso?

Quando o médico acha que um paciente pode ser infectado por bactérias, toma uma amostra do local da infecção, e envia para o laboratório. Ela é submetida ao processo de "seeding" e "incubação", criando uma colônia que facilitará um estudo mais aprofundado sob um microscópio.

O que podemos mostrar a estes procedimentos?

Estes procedimentos podem nos mostrar os microorganismos que causam doenças e são chamadas de "agentes patogênicos". Eles pertencem a classes diferentes:

Bactérias

Elas são organismos unicelulares (constituídos por uma única célula) muito pequenas (no máximo alguns milésimos de milímetro de comprimento). Em geral, elas são capazes de desenvolver de forma independente no meio em que vivem. Elas são procariotos, porque o seu núcleo não é diferenciado e geralmente são cobertas com uma parede celular espessa.

Mycoplasma e outros organismos na classe molicutes

Um tipo de bactéria sem parede celular, tornando-as difíceis de se ver sob um microscópio e também difícil de cultivar. Eles são os menores organismos conhecidos capazes de viver de forma independente.

Clamídias e riquétsias

Clamídias e riquétsias são bactérias minúsculas que só podem viver dentro de outras células.

Protozoários

Alguns são multicelulares, como vermes (também seus ovos e larvas) e outros protozoários Ao contrário das bactérias, protozoários são eucariontes (têm um núcleo  distinto do resto da célula por uma membrana nuclear). Os vermes, larvas, ovos e protozoários sob o microscópio ficam bem visíveis, e um microbiologista treinado pode identificá-los, muitas vezes sem  testes adicionais.

Fungos (e excepcionalmente algas)

Cogumelos podem ser cultivados de forma similar a bactérias e muitos deles são identificados pela morfologia presente na cultura.

Vírus

Eles são muito menores que as bactérias, por isso não podem ser vistos com um microscópio óptico convencional (mas com um microscópio eletrônico). Como a clamídia, não pode viver de forma independente, e necessitam de meios especiais (célula) para o cultivo.

Cultura bacteriana

Normalmente, a pele do nosso corpo é colonizada por diferentes espécies de microorganismos. Entre eles, existem diferentes tipos de bactérias.

Além disso, as membranas mucosas (boca, faringe, fossas nasais, mucosa genital, etc.) e o trato gastrointestinal (especialmente na sua parte final, que é o intestino grosso) são também lugares onde vivem uma variedade de espécies de bactérias.

Muitas dessas bactérias são inofensivas e, geralmente, incapazes de causar infecção. Elas são benéficas porque impedem a proliferação de espécies patogênicas ou porque elas produzem substâncias (vitaminas, por exemplo) que nosso corpo necessita.

Outras bactérias são capazes de causar infecções somente sob determinadas circunstâncias: quando crescem demais, ou em pessoas com mecanismos de defesa prejudicada (como em doenças do sistema imunológico ou quando se toma certos medicamentos).

Finalmente, existem bactérias que são capazes de causar danos, mesmo em tempos normais.

Quando o médico acha que um paciente pode ser infectado por bactérias, toma uma amostra do local da infecção, como exsudato (corrimento) da conjuntiva do olho em caso de conjuntivite, ou uma amostra de urina se houver uma infecção do trato urinário, ou líquido cefalorraquidiano  se é a suspeita é meningite.

As amostras podem vir de quase qualquer parte do corpo, e dependendo de qual é, a sua preparação será mais fácil (fezes ou urina, por exemplo) ou mais complicado e chato (por exemplo, o líquido comum em caso de artrite) .

Como é a cultura?

A amostra é enviada para o laboratório de microbiologia para o estudo, e até que seja processada, procurará ser alterada o mínimo possível. Portanto, são transportados e conservados em condições adequadas (por exemplo, temperatura e conteúdo de oxigênio no mesmo).

Uma vez no laboratório, o processo geralmente se inicia pela "semeadura". Isso amplia a amostra em uma placa de vidro ou plástico (placa de Petri) contendo um gel (ágar), ao qual foram adicionadas substâncias necessárias para que as bactérias cresçam. Chamamos isso de "médio". É adicionado às vezes outros tipos de substâncias, por exemplo, para impedir o crescimento de outras bactérias que podem contaminar a cultura.

O plantio pode ser feito em outros tipos de meios de cultura, tais como tubos de vidro gel, frascos de nutrientes líquidos para os microrganismos, e assim por diante.

Em seguida, proceder a "incubação" do meio. Em cada caso, é feito em condições de pressão de oxigênio, temperatura, agitação, duração, etc. Muitas bactérias patogênicas crescem em temperaturas próximas de 37 graus C normais do corpo.

Se a cultura bacteriana for bem sucedida, vão crescer "colônias" de bactérias em meio de cultura. Estas colônias tem diferentes características de cor, forma, tamanho, etc. para cada bactéria e isso nos ajuda a identificá-los. 

Algumas bactérias são muito difíceis de crescer, outros levam muito tempo para crescer e algumas não são capazes de cultivar.

Como é o estudo microscópico de bactérias?

Aa amostras contendo bactérias são transmitidas de uma placa de vidro chamado de "slides", secos e depois fixo (normalmente de aquecimento), de modo a  preservar a sua morfologia.

Em seguida, a amostra geralmente é tingida. Para isso existem muitos procedimentos, mas o mais utilizado é chamado de "Gram". Este sistema permite-nos apreciar melhor a forma das bactérias (cocos são bacilos, esférico alongado, etc.) E nos permite dividi-los em dois grupos de acordo com a cor adotada: gram-positivas e gram-negativas.

Às vezes, as amostras são observadas "frescos", isto é, diretamente, sem fixação ou coloração. Desta forma, você pode ver o movimento característico com algumas bactérias.

Algumas das bactérias que causam infecções importantes são:

Bactérias gram-positivas

  • Estafilococos: podem causar pneumonia, pele (pus) supurativa e abscessos em outros lugares, síndrome do choque tóxico, meningite, artrite, osteomielite, enterite, etc.
  • Estreptococos, podem ser infecção do sangue responsável, faringite, infecção das válvulas do coração, febre reumática, , pneumonia, etc.
  • Corynebacteria difteria, infecção urinária, etc.
  • Clostridia: tétano, botulismo, gangrena gasosa, do sangue, e assim por diante.
  • Bacillus: antraz.

Bactérias gram-negativas

  • Salmonella, Shigella e Campylobacter, pode causar infecção no intestino.
  • Escherichia coli e outras enterobactérias, pode causar pneumonia, infecção do trato urinário, infecção do sangue, e assim por diante.
  • Legionella: Pode causar pneumonia grave e atípica (doença dos legionários).
  • Meningocócica: pode causar meningite cerebrospinal.
  • Haemophyllus infecção respiratória, meningite, etc.
  • Gonocócica provoca gonorréia.
  • Brucella, brucelose (febre de Malta).
  • Pseudomonas: otites e infecções em vários locais em pessoas enfraquecidas (pneumonia em pacientes de UTI, a infecção no pé diabético, infecção respiratória em pacientes com fibrose cística, etc) ..
  • Bordetella: tosse convulsa.

Outras bactérias importantes não se coram bem com este método e temos que usar outros métodos para sua identificação,  como porexemplo as bactérias (micobactéria) que causam a tuberculose ou sífilis (Treponema).

Como estudar fungos e protozoários sob o microscópio?

Ambos são apenas ligeiramente maiores que as bactérias e podem ser identificadas usando um microscópio. Candidíase oral ou candidíase é causada por uma classe fungo (levedura) de fermento. Infecções de Candida na boca ou nos órgãos genitais podem ser identificadas usando amostras desses lugares.

Os protozoários podem ser encontrados em amostras com cotonetes de de fezes,  córnea, exsudados genital, sangue, etc. Podem causar várias doenças, incluindo: doenças sexualmente transmissíveis (trichomonas), malária (Plasmodium), (Babesia) babesiose botão leste (Leishmania), (amebíase), infecções intestinais (Giardia, etc.) Seu estudo ao microscópio, como os fungos, é semelhante à bactéria.

Parasitas, como vermes, muitas vezes podem ser identificados observando seus ovos ou formas adultas nas fezes.

Outros organismos menores como a clamídia, rickettsia, vírus e são mais difíceis de crescer, por isso, nestes casos, os meios de diagnóstico mais utilizado é o estudo de anticorpos contra estes organismos em uma amostra de sangue.

Como é que um estudo de células e tecidos?

O uso do microscópio é muito importante no estudo da estrutura de tecidos e células com características anormais. Por exemplo, é possível diagnosticar o câncer, uma vez que as células cancerosas freqüentemente têm formas anormais e estão dispostos em padrões irregulares.

Quando um patologista recebe uma amostra de tecido, geralmente obtido através de uma biópsia, começa  a dividir a amostra e depois ela é inserida em fixador químico formol ou outro. O tecido é fixo, então, incluídos em parafina e em seguida, cortado em fatias finas, o que pode ser manchado e observadas ao microscópio (após a remoção da parafina).

Se você acha que pode ter certos tipos de células, a amostra pode ser manchado por métodos específicos para cada tipo.

A obtenção de um resultado para este método pode, por vezes requerem mais de uma semana. Em caso de emergência (por exemplo, um paciente sendo operado, e os resultados do estudo do tecido é fundamental para decidir como continuar a intervenção), o resultado pode ser obtido em cerca de meia hora, usando um método que envolve o congelamento do tecido antes de cortar em fatias.

Especialistas - microscopia e cultura

Maria Cristina Gama de Oliveira

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Infectologista

Rio de Janeiro

Carolina Arana Stanis Schmaltz

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Infectologista

Rio de Janeiro

Maria De Fatima Magalhaes Acioly Mendizabal

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Médico clínico geral, Infectologista

Recife

Paola Santos

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Patologista clínico

Perguntas sobre Microscopia e cultura

Nossos especialistas responderam a 3 perguntas sobre Microscopia e cultura

Não. Há diversos seres microscópicos, parasitas ou não (de vida livre).
– Os protozoários (a exemplo da Giardia – causadora de infecções gastro-intestinais, e do Tricomonas – causador de…

Dr. Frederico Rocha
Generalista, Médico clínico geral, Patologista clínico
Rio de Janeiro
Nunca, o vírus foi identificado por Ivanovsky e confirmado por Martinus Beijerinck, analisando a folha do tabaco, usando o " filtro de coley". Vírus só através de microscopia eletrônica.

Dra. Keilla Mara Freitas
Infectologista, Intensivista
São Paulo
Existem várias formas de se encontra um vírus que por acaso esteja circulando no sangue, pode ser através de detecção de proteínas que nosso sistema de defesa produz especificamente ao entrar…

Quais profissionais realizam Microscopia e cultura ?


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